自2020年10月上海快靈發布“非洲豬瘟高敏PCR鐵數試劑盒”（下稱高敏試劑盒）以來，其出色的靈敏度、敏感性話慢、特異性及穩定性迅速被廣大(dà)豬場實驗室認可。随着熒光PCR相什愛關技術的普及以及用戶群體的增大(dà)，部分之前未被重視的問題也逐漸顯露化她出來。本篇我們(men)探讨下各廠家(jiā)水唱都諱莫如(rú)深的一個點——“假陽”問題，以及相應的解決方案。

“假陽”問題，事實上在熒光PCR領域并不(bù)少見，而造成假陽産術藍生的原因也是紛繁複雜：如(rú)操作不(bù)當污染、去為環境氣溶膠污染或者試劑生産過程污染等。本文所要探讨的“假陽”我慢，主要指因試劑特異性導緻的假陽，換句話說(shuō)西友，即文中所提的“假陽”，與操作者、儀器(qì)、環境均無知綠關，隻與試劑盒内的試劑有關。那麼試劑盒中到底什麼與“假還吧陽”相關呢？縱觀商業化的非瘟病毒PCR檢測試劑盒，其中都路愛會(huì)提及一個重要參數——特異性。

何為(wèi)特異性呢？在PCR擴增過程中，如(r短船ú)果我們(men)要擴增的非洲豬瘟DNA片段在用報整條DNA鍊上不(bù)止出現了一次，或者樣品老城中混有的其他(tā)物種、細胞或病毒的DNA中含有類似唱房的DNA片段，則可能會(huì)将其他(t影自ā)片段擴增出來，那最後儀器(qì)顯示出來的陽性議中結果就不(bù)一定是非瘟病毒DNA造成的，于是陽性結果也就變成了假陽雜多。因此，通(tōng)俗來說(shuō)，特異性反應的她綠是試劑盒能擴增出特定DNA片段的性能，特異性越低(dī)，則試劑盒擴增其他(場他tā)片段的概率就越大(dà)，即“假陽”幾率更大(路謝dà)。
   市售的衆多非瘟病毒PCR檢測試劑盒中，絕大(dà)多數廠商在宣傳其試劑盒特還著異性時(shí)均會(huì)标注＞99%，最低(dī)也不(bù)會票線(huì)低(dī)于98%，快靈的高敏試劑林章盒也是如(rú)此，特異性可達到99.9%，屬實是已經做到了極限，即使PCR什多技術發展至今，因為(wèi)模闆DNA的不(b開北ù)确定，依然無法保證100%的特異性。也正因此，特異性視年，也就是假陽的問題是被大(dà)家(jiā)忽視了。

在服務客戶的過程中，我們(men)發現很多客戶在進行非哥村瘟病毒檢測遇到極弱樣本或疑似樣本時(shí刀嗎)，對于陽性場，往往遵循的是“甯殺錯(cuò)，不(bù)放過”，而對于陰性場，往往帶來心理的恐慌，需要确認到底是不(bù)是陽性。的确志還，随着非瘟一波波的襲來，各檢測單位的工(gōng)作量都史無綠船前例的倍增，再重新來一遍的全面複核，顯然是對人力和成照為本的巨大(dà)考驗。面對這樣的大(dà)環境，快靈人陷入了沉思。

“我們(men)為(wèi)什麼要甯殺錯(cuò)？”

“當真沒有辦法消除假陽麼？”

帶着這樣的問題，我們(men)開(kāi)始了新自道的一輪又一輪的嘗試：提升試劑盒的靈敏度、內身将特異性由99%提升至99.9%……或許，我們(me北的n)可以把眼界放寬，不(bù)局限于單純的擴增？

于是，高敏試劑盒上市半年後，我們(men)水那在高敏試劑盒基礎之上研發出其“升級版”——快靈高敏試劑盒（熔解确報技認版）。

快靈高敏試劑盒（熔解确認版），其性能參數與高敏試這吃劑盒一緻，我們(men)同樣保證其靈敏度、敏感性、穩定性、特異性處在行業頂尖水的務平，确保客戶可以第一時(shí)間檢測出陽性樣本。包括其操作、擴增階段也與看水高敏試劑盒别無二緻，至此，我們(men)可以把快靈高敏試劑盒（熔會匠解确認版）等同于高敏試劑盒。詳見表1：

表1：高敏試劑盒與假陽确認試劑盒基本性能參可城數對比

但，重點來了！快靈是怎麼做到的？快靈高敏試劑盒（熔解确認版）突破性地使月山用了一個新的反應程序——熔解曲線。熔解曲線能鑒别不(bù)同的DNA片段，依校司靠的不(bù)是Ct.值，而是其特有的熔解峰，即Tm值，即使一個D喝資NA片段中僅相差一個堿基，都能導緻Tm值變動。依靠Tm值的知房判定就可以确認之前擴增陽性的非瘟樣本是否為(wèi)真的非瘟陽性，以此達到鑒别藍微假陽，消除客戶疑慮的目的。

     錯我; 

圖1：擴增曲線Ct.值判讀陰陽   &nbs通城p;    圖2：熔解曲線檢制資測疑似/弱陽樣本，排除假陽

非瘟新形勢下，除了要求試劑盒更早的檢測出陽性，更需要真正“精準”檢測。快靈醫舊高敏試劑盒（熔解确認版）除了超高的靈敏度、特異性，更是“自帶”熔解曲線，讓喝子假陽無處可藏，讓弱陽“站得(de)住腳”，真舞少正做到打消客戶疑慮，真正做到“不(bù)校多殺錯(cuò)、不(bù)放過”。