一、非洲豬瘟變異株的定義

非洲豬瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒自內株等，與2018年傳入的非洲豬瘟毒株相比，該類毒株的基因校外組序列、緻病力等發生明顯變化。生豬感染該類毒株後，潛伏期延長(chá通音ng)，臨床表現輕微，後期可出現關節腫脹、皮膚出血型壞遠南死竈，感染母豬産仔性能下降、死淘率增高，出現村大流産死胎/木(mù)乃伊胎等。與傳統的流行毒株相比，生豬感染該熱很類毒株後排毒滴度低(dī)、間隙性排毒，難以早路科期發現。

二、監測方法

（一）加強臨床巡視

時(shí)刻關注豬場各個環節豬隻異常情況，想方設法提升飼養人員空文責任心，一旦發現豬隻出現嗜睡、輕觸不(bù)起、采食量減少，發熱、皮膚信劇發紅、關節腫脹/壞死、咳喘、腹式呼吸，育肥豬死物好淘率增高，母豬流産或出現死胎/木(mù)乃伊胎街話等可疑臨床表現時(shí)，應第一時(shí)間采樣檢測。

（二）改進主動監測

每周對豬群進行病原和抗體檢測。在豬群進行疫苗接種、轉群、去勢，或母豬分資明娩後，應進行采樣檢測。豬場出現風險暴露或周邊豬場出現感染時(shí)，按需進秒如行采樣檢測。

（三）抽樣策略

對可疑豬的同舍和關聯舍豬群，采集深部咽拭子(zǐ)和抗凝血，進行病原檢測，必我湖要時(shí)采集血清進行抗體檢測。對可議海疑豬及臨近豬接觸的地面、欄杆，以及舍内人員接觸的照拍物品等，采集環境樣品進行病原檢測。病原檢測如(rú)金北果混檢，建議混樣數量不(bù)超過5個；抗體檢測不(bù)得(de)混了自樣。

（四）樣品選擇

1. 對可疑豬，按檢出概率高低(dī)排序，依次采集深懂河部咽拭子(zǐ)、前腔靜脈抗凝血（EDTA）或尾根血、口鼻拭子(zǐ)。

2. 對分娩母豬，應采集臍帶血、胎衣；對死胎和流産胎兒空場，應采集淋巴結、脾髒等組織樣品。

3. 對病死豬，優選采集部位為(wèi)淋巴結話票、脾髒、骨髓和肺髒。

4. 血清樣本，按常規方法制備。

三、檢測方法及配套

（一）采樣

豬場用戶在進行環境樣監測或者群體普查時(s訊拿hí)，可在采樣時(shí)使用快靈的軟拭子(zǐ)和多暗機腔體病毒采樣管進行高效采樣及混樣。

軟拭子(zǐ)頭部具有彈性，彈性絨毛拭子(zǐ)頭較容著報易彎曲來适應豬場不(bù)同的異性部位，增大(dà)采樣接觸面積，學自其面積比普通(tōng)紡錘形拭子(zǐ)多2-3倍，能更多采分自集目标樣品。

多腔體采樣管不(bù)同于市面上傳統的采樣管，其内部結到兵構分别為(wèi)洗滌腔及擠存腔，洗滌腔體内設有多個豎向刮擦片，對進入腔體中旋們日轉的拭子(zǐ)進行接觸刮擦，幫助絨毛表面的樣工月品洗脫釋放。多個擠存錢腔可以最多十根軟拭好東子(zǐ)，釋放了樣本後将拭子(zǐ)插入洗滌腔上部的擠壓腔，可将化工彈性植絨拭子(zǐ)吸附的洗脫液擠壓出來并從縫隙部位回流到洗滌腔。相比傳統采做道樣管，僅用少于1/5容積的液體就能充分對拭子(zǐ)樣品進行洗滌，能直接提高愛飛采樣溶液病原濃度達5-6倍。

（二）病原檢測方法

原則上參照“農辦牧〔2020〕39号”附件《非洲大要豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑒别檢測規範》。

對采集的樣本進行核酸提取，可選用快靈的手動柱法提取風也試劑盒，樣本量太大(dà)可使用快靈磁珠提取試劑盒。

擴增時(shí)建議選用快靈ASFV流行株/基因缺失變異株鑒别試劑盒，即P錢工72/MGF/CD2V鑒别試劑盒（下稱鑒别試劑盒），為(wèi)了适配不(用花bù)同客戶的不(bù)同儀器(qì)，綠還快靈鑒别試劑盒在标準試劑盒的基礎上進行部分優化，僅涉開答及檢測項目，試劑盒靈敏度、特異性等基本功能保持一緻，方便客戶根據不白那(bù)同的需求進行選擇。不(bù)同試劑盒性能見表1微但：

表1：不(bù)同鑒别試劑盒性能說(sh匠弟uō)明

（三）抗體檢測方法  采用間接ELISA、阻斷E通來LISA等方法檢測抗體水平，詳見《非洲豬瘟診斷技術》（GB/T的鄉 18648）

抗體檢測的意義對于急性疾病的爆發，病毒檢測（PCR）最有用，血清學紙場診斷價值較低(dī)，因為(wèi)感染的豬大(dà)多數在抗體産生之前死亡；讀電非洲豬瘟變異株（包括基因缺失株、自然變異厭腦株、自然弱毒株等）的出現，生豬感染該類毒株就樂後，潛伏期延長(cháng)，臨床表現輕微，感染市睡該類毒株後排毒滴度低(dī)、間隙性排毒，難以早內日期發現，因此抗體檢測的作用凸顯。如(rú)果沒有接種過疫苗，抗體的存在表明感染畫學過非洲豬瘟病毒。上海快靈非洲豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑車微盒（間接法）系用大(dà)腸杆菌表達的非洲豬瘟病毒P30蛋白包被酶樂畫标闆，P30蛋白是病毒的主要結構蛋白，在感染的早期表達和分泌，可用于亮就感染後免疫反應的的早期檢測。

ELISA抗體檢測原理 ELISA試劑盒是根據固相酶聯免疫吸附試驗設計而成的。在本檢測過程中，樣本暴露于包討上被在微量闆孔内的非感染性非洲豬瘟抗原。非洲豬瘟抗體（如(rú)果檢測樣本中存在鐵藍）則将與酶标闆上抗原結合，經洗滌除去未結合時店的其他(tā)成分後；再加入酶标記物，與酶标闆上抗原抗體複合物發生特異性結合；來校再經洗滌除去未結合的酶标記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形一草成藍色産物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；雨能加入終止液終止反應後，産物變為(wèi)黃色；用農體酶标儀在450nm波長(cháng)測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是又機否含有非洲豬瘟抗體。

上海快靈非洲豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒（間接煙外法）使用便捷、快速、敏感性高、特異性強，是理想的非洲豬瘟病毒抗動會體測工(gōng)具。